緩沖溶液的計(jì)算分為兩大類:(1)已知共軛酸堿的濃度或質(zhì)量,計(jì)算pH值。(2)已知pH值,計(jì)算配制時要滿足的濃度和質(zhì)量配制緩沖溶液時,有多種組合的方法,常見的有以下幾種(1)兩種溶液混合:如,NH3+NH4Cl溶液,NaOH溶液 +NH4Cl溶液,NH3+HCl溶液。(2)固體試劑+溶液:如,NH3+NH4Cl固體,NaOH固體 +NH4Cl溶液,HAc+NaAc固體。(3)兩種固體試劑溶解混合:如,NaOH固體 +NH4Cl固體,Na2CO3固體+NaHCO3固體。由此可見,緩沖溶液的計(jì)算類型是很豐富的。實(shí)驗(yàn)中的配制一般是按共軛酸堿的量來稱取或量取試劑后,再溶解混合到指定體積。但分析化學(xué)學(xué)習(xí)中的計(jì)算類型則可以演繹出十幾種計(jì)算情況。檢測試劑盒在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗刷三次。尿素(Urea)檢測試劑盒(二乙酰一肟微板法)
檢測試劑盒檢測成果分析辦法:如果呈現(xiàn)規(guī)范曲線的線性欠好,或平行性欠好(雙孔對照孔的OD值不同很大),或呈現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象,可能引起的原因有酶標(biāo)板孔間彼此污染、洗板后未能盡快進(jìn)行下一步操作、添加樣品或其它試劑時操作的辦法不對、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸騰、酶標(biāo)板孔問參加的試劑量不同,相對應(yīng)的解決辦法是加樣時請當(dāng)心勿將液體濺人另一孔中,人工洗板時也請當(dāng)心,勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時進(jìn)行下一步操作、添加試劑時請懸空滴入,牢記勿將頭接觸到板孔內(nèi),吸取不同試劑瓶中的液體時就要替換一次頭、確認(rèn)孵育環(huán)境不透光,蓋板膜將酶標(biāo)板密封好、運(yùn)用已校正過的微量加樣器,如將次參加液體時頭上留有一滴的液體滴下,那么將今后頭上留有的液體也滴下,以保證參加液體體積的一致性。磷酸-三乙胺緩沖液(pH3.2)液體試劑易于分劑量,服用方便。
試劑盒實(shí)驗(yàn)遇到復(fù)孔該怎么辦。在設(shè)計(jì)復(fù)孔檢查時,提出問題:是對同一個樣品作兩次稀釋,再別離加到板上的兩個孔,仍是只稀釋一次,然后羅致兩次別離加到兩個孔?前者好像把稀釋時的過錯也考慮到了,但做出來的成果兩個孔相關(guān)挺大的。在實(shí)驗(yàn)中設(shè)復(fù)孔,意圖是為了削減本次實(shí)驗(yàn)的體系過錯對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)帶來的影響,所以應(yīng)該用第二種,有條件的話復(fù)孔的數(shù)量能夠添加,體系過錯更小。選用后者。假定在實(shí)驗(yàn)室階段,或許需求屢次稀釋,然后將不同稀釋次數(shù)的別離做復(fù)孔,以便檢查稀釋進(jìn)程中帶來的過錯;假定同一次稀釋的復(fù)孔一起的存在檢測差異大,或許板的均一性存在必定問題(打掃操作因素)。假定不同稀釋次數(shù)差異大,闡明稀釋方法有問題。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)取樣方式:在均勻性檢驗(yàn)的取樣時,應(yīng)從待定特性量值可能出現(xiàn)差異的部位抽取,取樣點(diǎn)的分布對于總體樣品應(yīng)有足夠的代表性,例如對份狀物質(zhì)應(yīng)在不同部位取樣;對圓棒狀材料可在兩端和棒長的1/4、1/2、3/4部位取樣,在同一斷面可沿直徑取樣。對溶液可在分裝的初始,中間和終結(jié)階段取樣。當(dāng)引起待定特性量值的差異原因未知或認(rèn)為不存在差異時,則進(jìn)行隨機(jī)取樣。可采用隨機(jī)數(shù)表決定抽取樣品的號碼。對具有多種待定的特性量值的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),應(yīng)選擇有代表性的和不容易均勻的待側(cè)特性量值進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)。科研實(shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng):當(dāng)向量筒中傾倒液體接近所需刻度時,停止傾倒。
校準(zhǔn)液標(biāo)示值往往是按其基質(zhì)偏差修正的,所以標(biāo)示值并非實(shí)際值。校準(zhǔn)液、質(zhì)控血清通常是經(jīng)過處理的混合人或動物血清,這種制備物在特定分析系統(tǒng)中往往與人新鮮血清反應(yīng)性不同而產(chǎn)生基質(zhì)偏差。如總膽固醇測定基質(zhì)效應(yīng)研究指出:校準(zhǔn)液酶法測定回收結(jié)果偏低可達(dá)5%~7%。甘油三酯測定,有人主張選用雙試劑方法消除內(nèi)源性甘油,這個方法是可行的,但忽視了一個化學(xué)平衡理論。因?yàn)樗械孽ピ谒芤褐卸疾皇呛唵蔚匾怎サ男问酱嬖冢且运馀c酯化相平衡的形式存在。在一個平衡體系中,如果去除游離甘油,這個平衡就向生成甘油方向移動,甘油三酯就會重新水解,生成新的甘油,達(dá)到新的平衡,因此樣品與R1試劑孵育時間越長,測得甘油三酯值就越低。甘油三酯測定,不只要去除游離甘油,而且還要克服樣本含量真實(shí)性發(fā)生的變化,試劑中必須加入甘油激酶,并且延遲時間要標(biāo)準(zhǔn)化。所以,一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時,會帶來樣品含量真實(shí)性的變化。注意ELISA檢測試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。大鼠血清
液體試劑給藥途徑多,可以內(nèi)服,外用。尿素(Urea)檢測試劑盒(二乙酰一肟微板法)
如何降低檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)的誤差概率?檢驗(yàn)技師。應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。仔細(xì)閱讀說明書。嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。檢測試劑盒不同批號的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。洗滌干凈。洗板不干凈,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽性。尿素(Urea)檢測試劑盒(二乙酰一肟微板法)